購買前先必讀
非變性蛋白電泳Marker轉(zhuǎn)膜問題
http://m.h137.cn/news_detail.aspx?NewsID=248
寬分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker（21-880
kD）
Broad
MW Native Electrophoresis Protein Marker（21-880
kD）
●產(chǎn)品編號及規(guī)格：
RTD6144 20次 100
μl
●儲存及運輸條件：
-20℃保存，濕冰運輸，有效期為12個月。
● 產(chǎn)品簡介：
本產(chǎn)品有5種蛋白組成，分子量范圍為21-880
kD，經(jīng)過非變性電泳后，用考馬斯亮藍染色后可以得到5條主帶。
|
蛋白名稱
|
分子量(kD)
|
蛋白來源
|
pI
|
說明
|
|
Ferritin
|
440
880
|
equine
spleen
|
N/A
|
非變性下440kD和880
kD
|
|
Carbonic
Anhydrase
|
300
|
Bovine
Erythrocytes
|
6.4
|
單體分子量29kD，非變性下為10聚體，低于300kD有電荷異構(gòu)體（charge
isomer）
|
|
Lactic
Dehydrogenase
|
165
|
Microorganism
|
4.5
|
球蛋白，單體分子量36 kD，非變性下可形成四聚體
|
|
Ovalbumin
|
45
|
egg
white
|
4.71或4.59
|
球蛋白，分子量為45kD，非變性條件下大于45kD會出現(xiàn)電荷異構(gòu)體（charge
isomer）
|
|
Trypsin
Inhibitor
|
21
|
Soybean
|
4.5
|
非變性下21 kD
|
● 使用說明：
1. 取出產(chǎn)品后，常溫融化后，徹底混勻，上樣電泳。
注：上樣量根據(jù)膠的厚度和梳子的寬度確定。一般說來，1.0厚度10齒梳子加樣孔上樣5 μl，1.0厚度15齒梳子加樣孔上樣量2.5 μl，其他規(guī)格梳子請適當調(diào)整上樣量。
2. 該產(chǎn)品不含蛋白凝膠制備試劑，您可以選擇非變性PAGE凝膠制備及電泳試劑盒（貨號：RTD6130）或者蛋白預(yù)制膠（貨號RTD6118）。如自備試劑，經(jīng)典Laemmli系統(tǒng)中把制膠溶液、電泳緩沖液和上樣緩沖液中的SDS和還原劑（DTT或β-巰基乙醇）全部去除即可進行非變性電泳。
3. 電泳條件：
建議使用10%非變性膠或者4-20%梯度非變性膠（貨號：RTD6118-0420）進行電泳。
|
恒電壓
|
120 V
|
|
起始電流
|
27-35 mA/板膠
|
|
結(jié)束電流
|
7-10 mA/板膠
|
|
電泳時間
|
1h20min+
|
4. 電泳結(jié)束后，考馬斯亮藍染色，觀察結(jié)果。
注：使用銀染染色時，由于靈敏度高于考馬斯亮藍染色方法，需要適當降低Marker上樣量，一般稀釋50倍后上樣。
注意：
1. 本蛋白Marker不適用于變性蛋白電泳（SDS-PAGE），因為在SDS存在下，含有多個亞單位的蛋白會不同程度解聚。
2. 在非變性條件下，蛋白的遷移與蛋白的電荷、蛋白形狀以及蛋白分子量都有關(guān)。因此，在一種凝膠濃度下使用本Marker不能精確估計出目的蛋白的分子量。非變性電泳中，蛋白分子量的確定應(yīng)該是在不同凝膠濃度下，確定出蛋白的Rf值，繪制出凝膠濃度對Rf的曲線從而判定蛋白的分子量。
● 實驗示例：
1 4-20% Tris-甘氨酸 非變性膠電泳：
4-20% RealPAGE Precast Gel
1×TG 200V 50-19mA 47min
2. 4-16% Blue Native：
3： 4-15% Tris-甘氨酸非變性：
使用RTD6144寬分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker （21-880）kD產(chǎn)品發(fā)表部分文章列表：
1.
[2023 IF11.7] A nanoparticle-based wireless deep brain
stimulation system that reverses Parkinson’s disease.
Author: Junguang Wu, Xuejing Cui, Lin Bao, Guanyu
Liu, Xiaoyu Wang, Chunying Chen
Journal: Sci. Adv. 11, eado4927
(2025) 15 January 2025
Institution: National center for nanoscience and technology of china
Paper link：https://www.science.org/doi/10.1126/sciadv.ado4927
